Любая частица, будь то молекула, атом или ион, в результате поглощения кванта света переходит на более высокий уровень энергетического состояния. Чаще всего осуществляется переход из основного в возбужденное состояние. Это вызывает появление в спектрах определенных полос поглощения.
Поглощение излучения приводит к тому, что при пропускании его через вещество интенсивность этого излучения снижается при увеличении количества частиц вещества, обладающего некоторой оптической плотностью. Этот метод исследования предложил В. М. Севергин еще в 1795 году.
Наилучшим образом этот метод годится для реакций, где определяемое вещество способно переходить в окрашенное соединение, что вызывает изменение окраски исследуемого раствора. Измерив его светопоглощение или сравнив окраску с раствором известной концентрации, несложно найти процент содержания вещества в растворе.
Основной закон светопоглощения
Суть фотометрического определения заключается в двух процессах:
- перевод определяемого вещества в поглощающее электромагнитные колебания соединение;
- замер интенсивности поглощения этих самых колебаний раствором исследуемого вещества.
Изменения в интенсивности потока света, проходящего через светопоглощающее вещество, будут вызываться также потерями света из-за отражения и рассеяния. Чтобы результат был достоверным, проводят параллельные исследования по замеру параметров при той же толщине слоя, в идентичных кюветах, с тем же растворителем. Так снижение интенсивности света зависит главным образом от концентрации раствора.
Уменьшение интенсивности света, пропущенного через раствор, характеризуют коэффициентом светопропускания (также принято называть его пропусканием) Т:
Т = I / I0, где:
- I — интенсивность света, пропущенного через вещество;
- I0 — интенсивность падающего пучка света.
Таким образом, пропускание показывает долю непоглощенного светового потока, проходящего через изучаемый раствор. Обратный алгоритм значения пропускания называют оптической плотностью раствора (D): D = (-lgT) = (-lg) * (I / I0) = lg * (I0 / I).
Это уравнение показывает, какие параметры являются главными для исследования. К ним относится длина волны света, толщина кюветы, концентрация раствора и оптическая плотность.
Закон Бугера-Ламберта-Бера
Он является математическим выражением, отображающим зависимость уменьшения интенсивности монохроматического потока света от концентрации светопоглощающего вещества и толщины жидкостного слоя, через который он пропущен:
I = I0 * 10-ε·С·ι, где:
- ε — коэффициент поглощения света;
- С — концентрация вещества, моль/л;
- ι —толщина слоя анализируемого раствора, см.
Преобразовав, эту формулу можно записать: I / I0 = 10-ε·С·ι.
Суть закона сводится к следующему: различные растворы одного и того же соединения при равной концентрации и толщине слоя в кювете поглощают одинаковую часть падающего на них света.
Прологарифмировав последнее уравнение, можно получить формулу: D = ε * С * ι.
Очевидно, что оптическая плотность напрямую зависит от концентрированности раствора и толщины его слоя. Становится ясен физический смысл молярного коэффициента поглощения. Он равен D для одномолярного раствора и при толщине слоя в 1 см.
Ограничения применения закона
Этот раздел включает следующие пункты:
- Он справедлив исключительно для монохроматического света.
- Коэффициент ε связан с показателем преломления среды, особенно сильные отклонения от закона могут наблюдаться при анализе высококонцентрированных растворов.
- Температура при измерении оптической плотности должна быть постоянной (в рамках нескольких градусов).
- Световой пучок должен быть параллельным.
- рН среды должен быть постоянным.
- Закон применим для веществ, светопоглощающими центрами которых являются частицы одного вида.
Методы определения концентрации
Стоит рассмотреть метод градуировочного графика. Для его построения готовят ряд растворов (5-10) с различной концентрацией исследуемого вещества и замеряют их оптическую плотность. По полученным значениям выстраивают график зависимости D от концентрации. График является прямой линией, идущей от начала координат. Он позволяет легко определить концентрацию вещества по результатам проведенных измерений.
Также существует метод добавок. Применяется реже, чем предыдущий, но позволяет проанализировать растворы сложного состава, поскольку учитывает влияние дополнительных компонентов. Суть его состоит в определении оптической плотности среды Dx, содержащей определяемое вещество неизвестной концентрации Сх, с повторным анализом того же раствора, но с добавлением определенного количества исследуемого компонента (Сст). Величину Сх находят, используя расчеты или графики.
Условия проведения исследования
Чтобы фотометрические исследования давали достоверный результат, необходимо соблюдать несколько условий:
- реакция должна заканчиваться быстро и полностью, избирательно и воспроизводимо;
- окраска образующегося вещества должна быть устойчива во времени и не изменяться под действием света;
- исследуемое вещество берут в количестве, которого достаточно для перевода его в аналитическую форму;
- замеры оптической плотности проводят в том интервале длин волн, при котором различие в поглощении исходных реагентов и анализируемого раствора наибольшее;
- светопоглощение раствора сравнения принято считать оптическим нулем.
